贴壁细胞解离好帮手｜0.25% 胰蛋白酶溶液，助力细胞实验稳定开展

在细胞体外培养实验中，细胞解离是传代、收样、单细胞制备环节里十分关键的步骤。解离效果的好坏，会直接影响后续细胞活性、细胞状态以及下游实验数据的可靠性。不合适的解离试剂，容易出现细胞难以脱落、消化过度损伤细胞膜、细胞成团等各类实验问题。0.25% 胰蛋白酶溶液（含 EDTA、酚红，溶于 PBS）作为细胞实验室常用的解离试剂，适配多数贴壁细胞的日常操作，为细胞培养工作提供稳定支持。

背景介绍

体外细胞培养过程中，多数贴壁细胞会依靠细胞间粘附蛋白、细胞外基质锚定在培养器皿表面。当细胞生长到达合适密度，需要进行传代、冻存、功能检测等操作时，就需要借助酶类试剂打破细胞‑细胞、细胞‑培养板之间的粘附连接，把贴壁生长的细胞转变为单细胞悬液。

胰蛋白酶属于丝氨酸水解酶，是细胞解离领域应用广泛的酶类。单纯胰酶消化有时会出现解离不完全的情况，科研人员常会搭配 EDTA 协同使用。EDTA 作为螯合剂，能够结合环境中的钙离子、镁离子，削弱细胞粘附作用，以此提升解离效率。酚红作为 pH 指示剂，可直观反映溶液 pH 变化，方便实验人员把控实验条件，由此形成含 EDTA 与酚红的胰蛋白酶工作液配方，适配常规细胞培养场景

检测 / 作用原理

胰蛋白酶能够特异性切割多肽链中赖氨酸、精氨酸残基羧基端肽键，水解细胞之间的连接蛋白，破坏细胞粘附结构，让贴壁细胞从培养器皿表面脱离，分散成为单细胞。胰酶的酶活会受细胞类型、温度、pH、作用时间影响，37℃、pH8.0 条件下酶活表现较好，实验中需要把控消化时长，避免消化过度造成细胞损伤

配方内的 EDTA・2Na 发挥螯合作用，结合体系里 Ca²⁺、Mg²⁺，进一步削弱细胞间粘附力，和胰蛋白酶形成协同效果，改善解离表现。酚红作为 pH 指示剂，可通过颜色变化辅助实验者判断溶液 pH 状态；溶剂采用 PBS 缓冲体系，维持体系 pH 稳定，整体 pH 维持在 7.0‑7.4 区间，适配多数哺乳动物细胞的操作环境。

产品介绍

普诺赛0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA、酚红，溶于PBS）（货号 PB180229）为即用型液体试剂，无需自行配制，胰蛋白酶含量 2.5g/L，EDTA・2Na 含量 0.2g/L，酚红 10mg/L，以 10 mM PBS 作为溶剂，内毒素水平小于 3EU/mL。

0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA、酚红，溶于PBS）主要用于贴壁型细胞的解离操作，适配多种哺乳动物贴壁细胞系。不同细胞对胰酶耐受程度存在差异，部分半贴壁、酶敏感细胞，可选择更低浓度胰酶体系开展实验。常规操作流程：弃去旧培养基，PBS 清洗细胞，加入胰酶溶液，37℃环境孵育，显微镜下观察细胞形态，待细胞回缩变圆后，添加含血清培养基终止消化，吹打获得单细胞悬液，再进行后续传代、接种等操作。产品储存建议‑5~‑20℃低温保存，运输采用低温条件；开封后 4℃条件下建议一周内用完，使用量少可进行分装，规避反复冻融，产品有效期 12 个月。

应用领域

1. 细胞常规传代培养：各类贴壁细胞系、部分原代细胞的传代扩增，细胞冻存前的细胞收集。

2. 单细胞悬液制备：为流式细胞检测、细胞增殖凋亡实验、共培养模型构建提供合格单细胞样本。

3. 组织细胞初步解离：辅助部分组织样本消化，获取体外培养细胞。

4. 广泛科研方向：肿瘤生物学、神经炎症、伤口修复、纳米生物材料、食品生物、药理毒理等方向细胞体外实验，该试剂已被多篇 SCI 论文引用使用。

产品优势

1. 即用型成品试剂，无需自行称量、配液、过滤除菌，减少人工配制带来的误差与污染风险，节省实验准备时间。

2. 配方协同优化，胰蛋白酶搭配 EDTA 共同作用，兼顾解离效率，酚红指示剂方便实验人员直观观察体系 pH 状态。

3. 质量管控严格，内毒素控制在较低水平，依托标准化生产体系，批次表现较为稳定，适配科研实验需求。

4. 通用性较强，适配多数贴壁细胞，已经被多篇高影响力期刊论文选用，拥有较多实际科研使用案例。

5. 储存使用灵活，支持分装保存，减少反复冻融对酶活性的影响，适配不同用量的实验室使用场景。

已引用高影响因子文献

1. Spatiotemporal Drug Delivery via a Neonatal Spinal Cord ECM Hydrogel for Biomimetic Microenvironment Remodeling After Spinal Cord Injury，期刊 ADVANCED FUNCTIONAL MATERIALS，IF=19.900，2026 年发表。

2. Atorvastatin‑Driven Methuosis in Glioblastoma: A Biomimetic Nanodrug for Targeted Tumor Therapy，期刊 ACS Nano，IF=16.000，2026 年发表。

3. Sprayable polysaccharide‑based biomimetic double dressing with synergistic regulation for wound healing，期刊 BIOMATERIALS，IF=13.600，2026 年发表。

4. Microbiota‑derived propionate suppresses Salmonella virulence gene expression via LuxS quorum sensing，期刊 Microbiome，IF=12.700，2026 年发表武汉。

5. Single‑atom Pt doped nanoceria for enhanced cell phagocytosis and nanozyme activities in keratitis immune regulation，期刊 JOURNAL OF NANOBIOTECHNOLOGY，IF=12.600，2026 年发表。

总结

细胞解离是细胞体外实验的基础环节，试剂的品质会直接影响细胞活性和后续实验结果。0.25% 胰蛋白酶溶液（含 EDTA、酚红，溶于 PBS）采用成熟配方，即用型液体设计，搭配标准化的生产质控，兼顾解离效率与细胞友好性，适配绝大多数贴壁细胞传代、收样、单细胞制备等实验场景。

普诺赛0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA、酚红，溶于PBS）已被多篇不同研究方向的 SCI 论文引用，在肿瘤、材料、炎症、组织修复等研究中得到实际应用。实验过程中结合不同细胞的耐受特性，合理调整消化温度与时间，可进一步降低细胞损伤，助力细胞相关实验平稳推进。