THP-1细胞吞噬功能验证：乳胶颗粒与红细胞实验

THP-1细胞（别名：THP-1(ATCC)、Tohoku Hospital Pediatrics-1等）是一种源自人急性单核细胞白血病的小鼠单核细胞系，具有典型的单核细胞/巨噬细胞特性。作为悬浮生长的肿瘤细胞，THP-1广泛用于免疫调控、炎症反应、吞噬功能及单核细胞分化研究，是免疫学与肿瘤学领域的基础实验模型。

核心特性

种属：人（Homo sapiens）
组织来源：急性单核细胞白血病；单核细胞起源
生长特性：悬浮生长，需离心收集（禁止直接倾倒培养液）
细胞形态：圆形或椭圆形单核细胞，大小均一
生物安全等级：BSL-1（常规实验室安全操作）

培养方案

培养基配方

• 基础培养基：RPMI-1640（[PM150110]）

• 添加物： 

• 10% FBS（[164210]）

• 0.05 mM β-巯基乙醇（关键成分，维持细胞活性）

• 1% 双抗（青霉素-链霉素，[PB180120]）

• 无需额外成分：配方完整，直接使用

培养条件

• 气体环境：空气（95%）+ CO₂（5%）

• 温度：37℃

• 推荐传代密度：5×10⁵ – 1×10⁶ cells/mL

• 换液频率：每2-3天更换半量培养基（悬浮细胞无需消化）

关键注意事项

1. 悬浮细胞操作： 

• 传代或换液时需低速离心（800-1000 rpm，5 min）收集细胞，禁止直接倾倒培养液。

• 复苏后需静置1-2小时，待细胞沉降后再轻柔混匀。

2. β-巯基乙醇必要性：该成分对THP-1活性至关重要，不可省略。

3. 密度监控：细胞密度超过1×10⁶ cells/mL时需及时分瓶，避免营养耗竭。

4. 冻存与复苏： 

• 冻存液：无血清非程序冻存液（[PB180438]），无需缓慢降温，直接-80℃过渡后转入液氮。

• 复苏要点：快速融化（37℃水浴），离心去除冻存液后重悬。

生物学功能与应用场景

• 吞噬与抗原呈递：可吞噬乳胶颗粒、酵母聚糖及调理过的红细胞，适用于吞噬功能研究。

• 分化诱导：佛波醇酯（PMA/TPA）可诱导THP-1分化为巨噬细胞样表型，用于炎症模型构建。

• 免疫调控研究：表达补体C3受体与Fc受体，适用于抗体依赖性细胞毒性（ADCC）研究。

• 疾病模型：模拟单核细胞在白血病、动脉粥样硬化等疾病中的行为。

背景与来源

• 细胞起源：从1岁男性急性单核细胞白血病患儿外周血中分离建立，表面无免疫球蛋白表达。

• 功能验证：XC斑点形成试验阴性，无病毒颗粒分泌。

• 保藏信息：ATCC（TIB-202）、DSMZ（ACC-16）、ECACC（88081201）权-威机构保藏。

推荐操作流程

1. 传代步骤： 

• 收集细胞悬液，800-1000 rpm离心5 min，弃上清。

• 加入新鲜培养基重悬，按1:2-1:4比例分瓶。

2. 冻存技巧： 

• 收集对数期细胞，离心后用预冷冻存液重悬，直接-80℃保存24小时后转入液氮。

3. 计数与接种： 

• 使用血球计数板或自动细胞计数仪，维持密度在5×10⁵ – 1×10⁶ cells/mL。

THP-1细胞以其稳定的悬浮生长特性与明确的巨噬细胞分化潜能，成为免疫与肿瘤研究中的核心工具。严格遵循离心收集与β-巯基乙醇添加要求，可最大限度维持细胞功能与实验可重复性。