RAW 264.7细胞功能验证：吞噬乳胶颗粒与酵母聚糖

RAW 264.7细胞（别名：RAW264.7、RAW-264.7等）是一种源自Abelson鼠科白血病病毒诱导肿瘤的小鼠单核巨噬细胞白血病细胞系，具有典型的巨噬细胞功能特性。该细胞系广泛用于免疫学、炎症反应及肿瘤微环境研究，因其无需胰酶消化、易传代的特点，成为实验中常用的工具细胞。

核心特性

种属：小鼠（Mus musculus）
组织来源：Abelson病毒诱导的肿瘤；单核细胞/巨噬细胞起源
生长特性：贴壁生长，禁用胰酶消化（胰酶会诱导分化）
细胞形态：不规则形，存在少量分化细胞（属正常现象）
生物安全等级：BSL-2（需在二级生物安全柜操作）

培养方案（默认方案A）

培养基配方

• 基础培养基：DMEM（[PM150210]）

• 添加物：10% FBS（[164210]） + 1% 双抗（青霉素-链霉素，[PB180120]）

• 无需额外成分：已包含细胞生长所需全部营养，直接使用

培养条件

• 气体环境：空气（95%）+ CO₂（5%）

• 温度：37℃

• 推荐传代比例：1:2 至 1:8（根据细胞密度调整）

• 换液频率：每2-3天更换新鲜培养基

关键注意事项

1. 胰酶禁忌：严禁使用胰酶消化！胰酶会刺激细胞分化，建议用细胞刮刀轻柔吹打传代。

2. 传代时效性：超过3天未传代可能导致细胞自发分化，需密切监控密度。

3. 分化现象：培养过程中出现少量分化细胞属正常，无需过度处理。

4. 冻存与复苏： 

• 冻存液配方：55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO

• 储存条件：液氮（-196℃）长期保存，避免反复冻融。

生物学功能与应用场景

• 吞噬与抗原呈递：可胞饮中性红，吞噬乳胶颗粒或酵母聚糖，具备巨噬细胞典型功能。

• 免疫调控研究：LPS或PPD刺激后可诱导红细胞分解，适用于炎症信号通路（如TLR4）研究。

• 肿瘤微环境模型：用于模拟巨噬细胞与肿瘤细胞相互作用，筛选免疫调节药物。

背景与来源

• 细胞起源：由Abelson病毒诱导的小鼠白血病模型建立，表面抗原sIg⁻、Ia⁻、Thy-1.2⁻。

• 病毒安全性：XC斑点形成试验阴性，无病毒颗粒分泌。

• 保藏信息：ATCC（TIB-71）、ECACC（91062702）权-威机构保藏。

推荐操作流程

1. 传代步骤： 

• 吸弃旧培养基，PBS轻洗1-2次。

• 加入适量新鲜培养基，用细胞刮刀轻柔刮取贴壁细胞，吹打分散后分瓶。

2. 冻存技巧： 

• 收集对数期细胞，离心后重悬于预冷冻存液，逐步降温（-1℃/min）后转入液氮。

3. 复苏要点： 

• 快速融化（37℃水浴），离心去除DMSO后重悬，避免过度吹打。

RAW 264.7细胞以其稳定的巨噬细胞功能和便捷的培养特性，成为免疫与肿瘤研究中的理想模型。严格遵循无胰酶操作及传代时效性，可最大限度维持细胞活性与功能。