小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞关键特性详解

核心优势

• 功能完整性：保留表面活性物质（二棕榈酰卵磷脂）分泌能力，完-美模拟体内肺泡生理功能

• 高纯度保障：经SP-C（肺泡表面活性蛋白C）免疫荧光鉴定，纯度≥90%，附完整质检报告

• 无菌保障体系：通过14天微生物全项检测（支原体/细菌/真菌），HIV-1/HBV/HCV阴性认证

• 组织特异性：精准分离自肺泡区域，完整保留Ⅱ型细胞特征性结构（嗜锇性板层小体）

关键特性详解

细胞形态与功能

• 典型立方形或圆形上皮细胞样结构，顶端突入肺泡腔

• 胞质内富含嗜锇性板层小体（直径0.1-1.0 μm），内含平行排列的板层状磷脂结构

• 分泌表面活性物质，降低肺泡表面张力（维持呼气时肺泡开放，吸气时防止过度膨胀）

增殖与传代

• 可传代1-2代，建议接种密度为3×10⁴ cells/cm²

• 具有分化为Ⅰ型肺泡细胞的潜能，可用于肺损伤修复研究

冷冻保存

• 程序降温+含DMSO保护液的标准化流程，解冻后细胞活力≥80%

技术创新

双酶定向消化技术

• 胶原酶Ⅰ（200U/mL）+ 中性蛋白酶（0.1%）联合处理

• 37℃振荡消化25min，精准分离肺泡上皮层

• 差速贴壁法去除成纤维细胞污染（贴壁时间差20min）

质量控制

七维质检体系

1. 形态学鉴定：倒置显微镜观察典型Ⅱ型细胞特征（泡沫状胞质、板层小体）

2. 表面标记检测：SP-C/Prospero转录因子（SP-C是Ⅱ型细胞特异性标记）

3. 功能验证：嗜锇性板层小体电镜观察及表面活性物质分泌检测

4. 微生物检测：PCR+培养法双重验证无菌状态

5. 活力检测：台盼蓝排除法确保细胞活性

6. 遗传稳定性：STR基因型分析排除交叉污染

7. 交叉污染检测：ISO认证细胞库比对确认种属特异性

应用场景

肺疾病模型构建

• 肺纤维化模型（TGF-β1诱导）

• 急性呼吸窘迫综合征（ARDS）模型（LPS刺激）

• 表面活性物质功能障碍相关疾病（如新生儿呼吸窘迫综合征）

药物开发与毒性测试

• 表面活性物质替代疗法药物筛选

• 肺泡上皮屏障通透性改变相关药物评价

• 纳米颗粒肺部沉积与毒性研究

再生医学研究

• 肺损伤修复机制探究（Ⅱ型细胞向Ⅰ型细胞分化）

• 干细胞分化为肺泡上皮细胞的诱导体系优化

培养体系优化

专用培养基CM-M003

• 基础成分：DMEM/F12 + 5%优质FBS（低内毒素）

• 生长因子：KGF（角质细胞生长因子，10ng/mL）+ EGF（5ng/mL）

• 保护添加剂：谷氨酰胺（2mM）+ 抗氧化剂（0.5mM）

• 特殊添加物：1% ITS（胰岛素-转铁蛋白-硒）

培养建议

1. 包被处理：鼠尾胶原Ⅰ（2-5 μg/cm²）预处理培养器皿

2. 换液策略：初始48h静置培养，之后每2天半量换液

3. 传代时机：当细胞融合度达70-80%时，用0.25%胰酶（含EDTA）消化