血栓调节机制探索：凝血酶对小鼠肺动脉内皮细胞纤溶酶原激活物的影响

核心优势

• 高纯度保障：经CD31/PECAM-1免疫荧光鉴定，纯度≥90%，附完整质检报告

• 无菌保障体系：通过14天支原体/细菌/真菌多重检测，HIV-1/HBV/HCV阴性认证

• 组织特异性：精准分离自肺动脉干内层，完整保留天然血管功能特性

关键特性详解

细胞形态
呈现典型"铺路石"状单层多角形分布，完-美模拟体内血管内皮屏障结构，为研究血管通透性调节提供理想模型。

增殖能力
可稳定传代2-3代，建议接种密度为5×10⁴ cells/cm²，满足短期实验需求（如血管生成研究、炎症反应模拟等）。

冷冻保存
采用程序降温+含DMSO保护液的标准化流程，解冻后细胞活力≥85%，确保实验重复性。

技术创新

双酶定向消化技术

• 胰蛋白酶（0.25%）+ 胶原酶Ⅳ（200U/mL）联合处理

• 37℃振荡消化30min，精准分离内皮层

• 差速贴壁法去除成纤维细胞污染（贴壁时间差15min）

质量控制

七维质检体系

1. 形态学鉴定：倒置显微镜观察典型内皮细胞特征

2. 表面标记检测：CD31/CD34流式细胞术验证

3. 功能验证：乙酰化LDL摄取实验确认内皮特性

4. 微生物检测：PCR+培养法双重验证无菌状态

5. 活力检测：台盼蓝排除法确保细胞活性

6. 遗传稳定性：STR基因型分析排除交叉污染

7. 交叉污染检测：ISO认证细胞库比对确认种属特异性

应用场景

血管生物学研究

• 肺动脉高压模型构建（hypoxia/PDGF-BB诱导）

• 内皮屏障功能调控（VEGF/TNF-α刺激实验）

• 一氧化氮合成途径研究

药物筛选平台

• 抗血管新生药物测试（Matrigel管形成实验）

• 血栓调节药物开发（凝血酶敏感性检测）

• 纳米药物递送系统靶向性验证

疾病机制探究

• 慢性阻塞性肺病（COPD）相关内皮损伤

• 新冠-肺炎肺血管微血栓形成研究

• 糖尿病血管并发症模型构建

培养体系优化

专用培养基CM-M343

• 基础成分：DMEM/F12 + 10%优质FBS

• 生长因子：bFGF（5ng/mL）+ EGF（2ng/mL）

• 保护添加剂：谷氨酰胺（2mM）+ 抗氧化剂（0.5mM）

培养建议

1. 包被处理：PLL（0.1mg/mL）或明胶（0.1%）预处理培养器皿

2. 换液策略：初始48h静置培养，之后每2天半量换液

3. 传代时机：当细胞融合度达80-90%时，用0.25%胰酶消化

4.