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SH-SY5Y收货常见问题及解决方案

发表时间:2022-04-29  |  点击率:305

常温运输过程中,细胞不免受到震荡和温度变化的影响,出现皱缩、聚团甚至脱落的现象。遇到这种情况,不用紧张,只要正确处理,细胞就能恢复正常生长。


收货时皱缩

常温细胞收货后,把细胞放进细胞培养箱静置2-4小时即可。如果4小时后细胞仍然没有铺展开,密度适中的前提下可以静置过夜(过夜前倒出部分培养基,留5-10mL在瓶中,瓶盖拧松)。

收货时聚团

常温细胞收货后,先把细胞放进细胞培养箱静置2-4小时以稳定状态,再进行传代。传代用含EDTA的0.25%胰蛋白酶消化1-3min左右。

收货时脱落

常温细胞收货后,先把细胞放进细胞培养箱静置2-4小时以稳定状态再处理。脱落后的细胞通常聚团漂浮,通过离心将漂浮的细胞团收集起来,在离心管里进行胰酶消化后重新铺板即可。

贴壁细胞常规方法消化下来,和处理好的脱落细胞合并,混匀后铺板。

SH-SY5Y脱落处理步骤:

1.    1200rpm(约250g)3min离心收集细胞,去除旧培养基;

2.    PBS 重悬细胞,再次 1200rpm(约250g)3min离心,去除PBS;

3.    加入 1mL左右 0.25%胰酶重悬细胞,吹打1-2下吹起沉淀即可;

4.    放入细胞培养箱约 1-3min;

5.    用移液枪轻轻吹打细胞悬液,使细胞团分散;

6.    迅速加入 3-5mL含血清的培养基混匀以终止消化;

7.    1200rpm(约250g)3min离心,去除胰酶;

8.    加入新鲜培养基按合适比例接入无菌培养器皿中;

SH-SY5Y收货时皱缩、脱落

SH-SY5Y细胞收货时皱缩、脱落

 SH-SY5Y处理后第三天

SH-SY5Y细胞处理后第三天