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收到大鼠骨髓间充质干细胞后如何操作?

发表时间:2022-03-15  |  点击率:309

大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)分离自骨髓;骨髓是机体的造血组织,位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种:红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用,白细胞能杀灭与抑制各种病原体,包括细菌、病毒等;某些淋巴细胞能制造抗体。因此,骨髓不但是造血器官,它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中,是一种海绵状的组织,能产生血细胞的骨髓略呈红色,称为红骨髓。出生时,红骨髓充满全身骨髓腔,随着年龄增大,脂肪细胞增多,相当部分红骨髓被黄骨髓取代,最后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓基质系统内存在的骨髓间充质干细胞是一种除造血干细胞以外的、具有高度自我更新能力和多向分化潜能的干细胞,可以向骨、软骨、肌组织、皮肤、脂肪、神经等多种组织分化,因此可以作为组织工程中的种子细胞。在骨髓中,BMSC占骨髓有核细胞总数的0.001%-0.1%,含量极低。骨髓间充质干细胞的体外培养条件要求较高,在培养过程中,受贴壁时间、种植密度、血清含量、培养温度和培养基pH值等条件的影响。

大鼠骨髓间充质干细胞

1.首先,观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请及时与Procell技术支持联系。2.用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于细胞培养箱内静置培养,隔天再取出进行观察。

3.仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。

4.可将培养瓶内多余的培养基转移至50ml无菌离心管中,备用;细胞传代时,可以将该培养基按照一定比例和客户自备的培养基混合使用,让细胞逐渐适应培养条件。

5.确认细胞状态良好后,应及时将细胞冻存,再进行后续的实验,避免后期实验失误可能发生细胞污染或死亡而导致的细胞丢失。

6.建议客户收到细胞后前3天,100X、200X、400X各拍3-5张细胞照片,记录细胞状态,便于和Procell技术支持沟通交流。