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拿到鸡卵泡颗粒细胞应执行以下操作

发表时间:2022-03-14  |  点击率:238
  鸡卵泡颗粒细胞是卵巢的主要功能细胞,它们的增殖和分化直接影响卵巢功能活动,如卵泡的生长起始、发育、排卵、黄体形成和类固醇激素的分泌,细胞呈圆形或椭圆形。细胞总数约5×105个/瓶,细胞纯度高达80%以上,不含HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
  从鸡卵泡组织中分离出鸡卵泡颗粒细胞;成熟卵泡是卵巢的结构成分之一。卵泡腔大,卵丘明显。卵泡的子宫内膜细胞靠近卵泡的颗粒层,它们之间有基底膜。子宫内膜细胞呈多角形,胞质清晰,核圆形。细胞间可见许多毛细血管。外膜细胞位于最外层,多呈梭形,与周围结缔组织无明显界限。卵泡内的卵母细胞周围有一层菱形或扁平细胞。当卵泡开始发育,卵细胞生长时,周围的菱形细胞变成立方体,由单层长成多层。由于其细胞质中有颗粒,故称为颗粒细胞。初级卵泡的颗粒细胞为单层;次级滤泡的颗粒细胞增加至多层;成熟卵泡的颗粒细胞膨胀并成为单层。颗粒细胞核大而圆,颜色深。细胞的自由表面有许多细长的突起延伸到辐射区的凹陷处。

 

鸡卵泡颗粒细胞
 

 

  收到鸡卵泡颗粒细胞后,检查外包装是否完整,细胞培养瓶是否完好。并执行以下操作:
  1、用1.75%酒精棉球擦拭T25细胞培养瓶外部。
  2、将细胞放入37度培养箱中,并在处理前预热3-4小时,以稳定细胞状态。
  3、预热*培养基(包括1%双抗体)。
  4、显微镜下观察细胞生长情况,对不同倍数(40×、100×、200×各1个)的细胞进行拍照。
  5、如果细胞密度小,无菌操作,除去培养基。向每瓶中加入5-6ml步骤4中制备的培养基。将其放入37度的培养箱中。当细胞密度达到80%以上时,传代培养。如果细胞密度大,达到80%以上,则进行传代培养。