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RAW 264.7细胞培养基培养都会遇到哪些问题?

发表时间:2022-05-25  |  点击率:84
  RAW 264.7细胞培养基培养就是要对它的基础培养条件了如指掌,比如生长特性、细胞形态、所需的培养基,甚至培养环境、传代比例等等,做到知己知彼,才能百战百胜。那么我们在使用过程中都会遇到哪些问题呢?
  

RAW 264.7细胞培养基

 

  1、收货后,细胞不见了
  
  收到细胞,期待值满满地打开包装准备细胞培养,但在显微镜下却找不到细胞!这是因为RAW264.7细胞贴壁较松,快递运输路上受到颠簸,可能会脱落。脱落的细胞悬浮在培养基中不容易聚焦。这时候不用担心,把细胞放进培养箱静置两个小时就可以看到了。如果静置后看到的细胞仍偏少,请将瓶子里的培养基都转移到离心管里,1200rpm(约250g)离心3分钟,即可看到沉淀的细胞。细胞全部脱落,慌乱之下可能会一个细胞都找不着。这个时候离心验证是理想方法。
  
  2、收货处理后,细胞不贴壁
  
  将细胞离心收集,用新鲜的RAW 264.7细胞培养基重悬细胞放到新的细胞培养瓶里之后,可能会出现细胞成团漂浮、不贴壁的情况。这种情况下,把细胞离心收集,用1mL培养基重悬,慢慢地,轻轻地吹打,直到细胞被吹成单细胞,就可以重新铺板了。RAW264.7脱落后倾向于抱团,抱团时细胞是活着的,但很难贴壁。记得一定要把聚成团的细胞吹散成单细胞,不然细胞很难重新贴壁。
  
  正确的传代方法是RAW 264.7细胞培养基的关键,每一步操作都要细致入微,稍有不慎细胞就分化了。RAW264.7细胞不能用胰酶消化,许多实验室用细胞刮传代,这是一种非常经典好用的方法。普诺赛在RAW264.7细胞培养这十几年里,摸索出一个更不错的方法:吹打传代。吹打传代操作简单,对细胞培养的新手们更友好,也能更好地控制细胞分化率。