细胞学堂 | 大鼠骨髓间充质干细胞的分离提取

骨髓间充质干细胞（bonemarrowmesenchymalstemcells，BMSCs）来源于中胚层，是具有多分化潜能的细胞。细胞生物学表明，BMSCs具有较强的增殖能力和多向分化潜能。在不同诱导条件下，可向中胚层细胞如脂肪细胞、成骨细胞、肌细胞等分化。BMSCs是理想的种子细胞来源之一，在细胞替代治疗、基因治疗及组织器官再造中具有重要的临床应用价值。本期细胞学堂为大家整理了大鼠骨髓间充质干细胞分离提取的方法、注意事项及鉴定指标，帮助您快速上手开展实验。分离提取步骤骨髓取...

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细胞学堂 | 细胞培养中的小黑点，原来是它

提起细胞培养，相信很多老师都遇到过培养液中的“小黑点”，因无法确定它的身份而头痛不已。本期细胞学堂将为大家揭秘这些黑点究竟是什么，帮助您快速上手开展实验。01血清沉淀血清在融解过程中会产生大量的析出物，呈现出小颗粒样的东西，甚至呈纤维样，这是由于血清融解后导致的蛋白、盐类物质的析出。血清融解时混匀血清静置融解不混匀，出现黑点显微镜下的血清沉淀物影响因素通常血清析出物的多少与融解方法有关。通过4℃冰箱解冻和溶解过程持续摇晃混匀，可以有效避免沉淀产生，而37℃静置混匀则会有较多沉...

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细胞学堂 | BV2细胞形态问题大揭秘

BV2细胞系由E·Blasi于1990年建立，应用小鼠小神经胶质细胞经逆转录病毒介导转染v-raf/v-myc获得永生化，在模拟神经系统疾病和研究相关疾病机制方面应用广泛。BV2细胞保留有小神经胶质细胞多种形态、表征和功能特征，免疫组化结果显示，BV2细胞为MAC1、MAC2阳性，MAC3、胶质细胞原纤维酸性蛋白、半乳糖脑苷脂阴性。培养BV2细胞时，最常遇到的问题就是细胞形态异常，通常伴随着细胞形状改变、拉丝较多等，对大家的实验造成影响。本期细胞学堂为大家整理了BV2细胞的培...

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细胞凋亡的几种检测方法

细胞凋亡的几种检测方法：一形态学观察方法1、HE染色、光镜观察：凋亡细胞呈圆形，胞核深染，胞质浓缩，染色质成团块状，细胞表面有“出芽”现象。2、丫啶橙（AO)染色，荧光显微镜观察：活细胞核呈黄绿色荧光，胞质呈红色荧光。凋亡细胞核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧，可见细胞膜呈泡状膨出及凋亡小体。3、台盼蓝染色：如果细胞膜不完整、破裂，台盼蓝染料进入细胞，细胞变蓝，即为坏死。如果细胞膜完整，细胞不为台盼蓝染色，则为正常细胞或凋亡细胞。此方法对反映细胞膜的完整性，区别坏死细胞有一定的帮...

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疑难解析 | 2023年度直播答疑热点汇总

细胞培养过程中，我们通常会遇到各种各样的问题，这些问题一般是多种因素造成的，如细胞密度、培养环境、操作方法等。2023年，普诺赛围绕细胞培养问题，共举办了10场线上直播，吸引了万余人观看。直播期间，大家踊跃发言，提出了日常实验中遇到的问题。本期直播答疑筛选出部分问题做了详细解答。牙源性干细胞培养时，血清会诱导分化吗？血清成份复杂，里面包含抑制分化的因子，也包含促进分化的因子；间充质干细胞一类成体干细胞大多可以用血清培养，单能干细胞，用血清不会分化；胚胎干会细胞分化。血清的刺激...

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直播答疑 | 细胞培养答疑专场

12月14日的直播中，普诺赛直播间为大家介绍了细胞黑点、细胞状态变形、细胞空泡、聚团、脱落等常见问题，直播回放请至B站-“普诺赛生物”进行观看。本期直播答疑，从直播间提问中，筛选出部分有代表性的问题，做了详细解答。如有其他问题，也欢迎大家在公众号留言，我们将在线解答。消化时间过长会损伤细胞吗？消化时间过长会导致细胞膜蛋白的改变，最直观的表现就是消化后第二天漂浮细胞很多或者贴壁慢。胰酶消化不掉的，二次消化对细胞损伤小还是机械吹打对细胞损伤小？建议二次消化。细胞与细胞间的连接没有...

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细胞学堂 | A-498细胞知识盘点

A-498（人肾癌细胞）细胞由Aaronson·S建立，是从一名52岁女性肾癌患者的肾组织中分离出的具有上皮形态的细胞系。该细胞系是一种合适的转染宿主，在肿瘤研究中具有一定的应用价值，常作为肾细胞癌研究的模型。本期细胞学堂为大家整理了A-498细胞的培养条件与传代、冻存步骤及常见应用，帮助您快速上手开展实验。细胞形态A498细胞贴壁生长，呈上皮样形态，细胞铺开面积大，单位面积细胞总数量少，少量细胞有触角；低密度时可观察到单个细胞清晰的边缘，密度大于100%时边缘不清晰，细胞与...

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细胞学堂 | 实验室细胞计数指南

细胞计数是实验室中常见的一项操作，用于确定样品中细胞的数量，判断细胞数量是否满足实验需求。本期细胞学堂为大家整理了几种常见的计数方法：人工手动计数法、自动细胞计数仪法，以及悬浮细胞和贴壁细胞在不同密度下的镜下视野的参考范围，帮助您快速上手开展实验。1人工手动计数法即通过肉眼观察显微镜视野中的细胞数量，从而进行统计。操作步骤1将计数板及盖玻片擦拭干净，并将盖玻片盖在计数板上；2轻轻吹打细胞悬液，使细胞均匀分布；吸出10μL-20μL左右的细胞悬液滴在盖片边缘，使细胞悬液充满盖玻...

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