细胞辅助试剂在细胞培养、流式细胞术等实验中发挥关键作用。
细胞辅助试剂常见种类及其功能如下:
一、细胞培养辅助试剂
培养基
功能:提供细胞生长所需的基础营养物质(如氨基酸、维生素、无机盐)和生长因子。
类型:DMEM、RPMI-1640、MEM等,根据细胞类型选择不同配方。
补充物:胎牛血清(FBS)、人血清、抗生素(如青霉素-链霉素)、谷氨酰胺等,增强细胞生长稳定性。
细胞解离试剂
胰蛋白酶:分解细胞间蛋白质,使贴壁细胞脱落,用于传代培养。
EDTA:螯合钙、镁离子,抑制胰蛋白酶活性,常与胰蛋白酶联合使用(如0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA)。
胶原酶:用于消化组织块,释放单个细胞。
细胞冻存试剂
冻存液:含DMSO(二甲基亚砜)和血清,保护细胞在低温下免受冰晶损伤。
程序降温盒:控制冻存速度,提高细胞复苏存活率。
细胞附着因子
多聚赖氨酸、层粘连蛋白、纤维连接蛋白:涂覆培养皿表面,促进细胞附着和铺展,尤其适用于难贴壁细胞。
抗生素与抗污染试剂
青霉素-链霉素:防止细菌污染。
支原体祛除试剂:定期使用可预防支原体污染,维持细胞健康。
二、流式细胞术辅助试剂
红细胞裂解液(溶血剂)
功能:利用低渗原理裂解血液或骨髓样本中的红细胞,富集白细胞。
特点:温和裂解,保护白细胞膜完整性,减少碎片产生。
流式染色缓冲液
功能:稀释抗体、洗涤细胞,维持细胞活力并减少非特异性结合。
成分:含BSA(牛血清白蛋白)和叠氮钠,提供等渗环境。
固定剂与破膜剂
固定剂:如4%多聚甲醛,固定细胞形态,稳定表面抗原。
破膜剂:使抗体进入胞内检测细胞因子或核内抗原(如转录因子)。
组合产品:溶血、破膜、染色一步完成,简化操作流程。
细胞死活染料
膜不可透过性染料:如7-AAD、PI,仅进入死细胞,用于排除死细胞干扰。
可固定染料:如Zombie™系列,兼容固定和破膜步骤,提供更多荧光通道选择。
Fc受体封闭剂
功能:阻断免疫细胞(如B细胞、巨噬细胞)表面的Fc受体,减少非特异性抗体结合。
类型:抗小鼠CD16/CD32抗体、Human TruStain FcX™等。
细胞刺激剂与阻断剂
刺激剂:如PMA(佛波酯)+离子霉素,激活细胞内信号通路,促进细胞因子分泌。
阻断剂:如Brefeldin A(BFA)、莫能霉素,抑制高尔基体功能,阻断细胞因子分泌,使其在胞内积累。