UMNSAH/DF-1（鸡胚成纤维细胞）在生物反应器中的大规模培养技术优化

UMNSAH/DF-1细胞是源自10日龄家鸡胚胎的自发永生化鸡胚成纤维细胞株，经原代分离及长期传代培养筛选获得。该细胞株兼具成纤维细胞的典型特征与永生化细胞的稳定增殖能力，在生物医学研究中展现出独-特优势，尤其适用于病毒学研究、重组蛋白表达及疫苗生产等领域。

UMNSAH/DF-1鸡胚成纤维细胞特性

基础属性

种属：家鸡（Gallus gallus domesticus）

细胞形态：成纤维细胞样，呈梭形或星形贴壁生长

生长特性：接触抑制明显，但永生化特性保障长期传代稳定性

生物安全等级：BSL-1

关键优势

非转化性安全：软琼脂集落形成试验证实无致瘤性（免疫缺陷小鼠模型及半固体培养基中均未观察到肿瘤形成）

温度敏感性可控：专为禽类体温设计（38-40℃），39℃为最佳培养温度，避免37℃培养导致的状态衰退

高稳定性：经超过30代传代验证，基因型与表型保持高度一致

培养指南

培养体系

基础培养基：DMEM（PM150210）

血清补充：10% FBS（164210）

抗生素：1%双抗（PB180120）

气体环境：5% CO₂ + 95%空气

推荐传代比例：1:3至1:8（每2-3天）

关键操作要点

温度控制：

必须使用专用培养箱（38-40℃），温度波动易诱发细胞空泡化

收货后可能出现短暂空泡，稳定培养2-3代可恢复

冻存与复苏：

冻存液配方：55%基础培养基 + 40%FBS + 5%DMSO

液氮长期保存，复苏时快速融化并离心去除DMSO

换液频率：每2-3天更换新鲜培养基，维持营养供应

应用领域

病毒学研究：

作为禽类病毒（如禽-流感病毒、马立克氏病病毒）增殖的优选基质

支持病毒滴度测定与疫苗株筛选

重组蛋白生产：

高表达效率适用于禽源蛋白（如卵清蛋白、干扰素）的规模化制备

基因功能研究：

适用于CRISPR/Cas9基因编辑及稳定细胞系构建

疫苗开发：

作为重组病毒载体疫苗的生产平台（如腺病毒载体）

质量控制

细胞身份验证：STR基因分型与种属特异性PCR确认

微生物检测：无菌、支原体、病毒病原体阴性

活力保证：复苏后存活率≥90%，传代稳定性验证≥10代

来源追溯：ATCC保藏编号CRL-12203，全程可溯源

注意事项

避免37℃培养，建议配置专用培养箱

传代时消化时间控制在2-3分钟，避免过度刮取损伤细胞

冻存管标注清晰，严格遵循液氮保存规范

细胞信息

产品编号：UMNSAH/DF-1

保藏机构：ATCC（CRL-12203）

推荐配套试剂：

专用培养基套装（含DMEM+FBS+双抗）

细胞冻存液（预混型）

1. UMNSAH/DF-1细胞以其独-特的温度适应性和非致瘤特性，成为禽类细胞模型中的标-杆工具。严格遵循本指南操作，可最大限度发挥其在科研与工业应用中的价值。