内皮细胞位于血管内腔表面,形成一层连续的单层细胞屏障。它们不仅在物质交换和血管通透性控制中发挥关键作用,还参与血管张力调节、血液凝固、炎症反应以及血管新生等过程。因此,内皮细胞广泛用于血栓形成、动脉粥样硬化、炎症、肿瘤血管生成等疾病机制的研究。
平滑肌细胞位于内皮细胞下方的中层,主要功能是通过收缩与舒张调节血管管腔直径,从而控制血压和血流分布。平滑肌细胞在高血压、动脉粥样硬化、动脉瘤、支气管哮喘、肺动脉高压等疾病研究中广泛应用。
大鼠主动脉内皮细胞分离培养试剂盒,英文名称:Mouse Bone Marrow-Derived Macrophage Cells Isolation and Culture Kit;是普诺赛专为大鼠主动脉内皮细胞研发,试剂盒内含大鼠主动脉内皮细胞分离与提取所需的全套核心组分,并附带详细的操作说明书,开盒即用,方便高效。
使用普诺赛®大鼠主动脉内皮细胞分离培养试剂盒获取的细胞具有高纯度、高活率以及典型的形态学特征,细胞状态稳定,贴壁生长良好,适用于各类后续实验操作,具备良好的实验重复性与一致性
使用普诺赛®血管类原代细胞提取试剂盒分离获得的细胞贴壁性良好,状态稳定,具备典型的形态学特征。经免疫荧光检测证实,细胞特异性标志物呈阳性表达,细胞纯度可达90%。该试剂盒分离的细胞,实验重复性和结果一致性良好,适用于后续实验操作。
试剂盒组分及用途简述
清洗液:用于清洗血管组织,有效维持组织和细胞活性;并具抑菌作用,有助于降低污染风险。
内皮细胞消化液(主动脉 / 肺大动脉):对血管组织的内膜面进行消化,高效解离组织结构,获得内皮细胞悬液。
平滑肌细胞消化液:对血管平滑肌层组织进行消化解离,可充分解离组织块,获得单细胞悬液。
基础培养基与添加剂:提供细胞生长所需的营养成分,并维持目标细胞的优先生长。
铺板工作液:促进细胞贴壁,提高细胞增殖效率。
细胞滤网:物理过滤未完-全解离组织碎片和杂质,提高目标细胞纯度。
血管类细胞提取与培养常见问题
Q:细胞纯度不足
需彻-底清除血管表面的脂肪与结缔组织;分离平滑肌细胞时,应尽可能剥离外膜层和内膜层组织;消化内皮细胞时应严格控制消化时间及组织块大小(参考说明书组织块大小),避免因过度消化而降低细胞纯度。
Q:细胞得量少/活率低
细胞得率不足可能是因组织消化不充分,应确保消化液配制和保存符合说明书要求,并严格控制消化时间。
细胞活率低常见于消化过度,建议在吹打组织时操作轻柔,适时终止消化过程;取材过程中应快速操作,现取现用,并始终保持组织低温以减少细胞损伤。
Q:内皮细胞培养传代要点
内皮细胞相对较为脆弱,传代次数有限,生长速度慢。初期培养3天内细胞贴壁缓慢是正常现象。可通过离心换液后接回原皿即可。传代需在细胞汇合度达到80%以上,按1:2比例传代处理,并优先使用Accutase消化液进行消化;若无Accutase酶,可使用0.25%含EDTA的胰酶进行消化,严格控制好消化时间。