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人骨髓间充质干细胞提取方法

更新时间:2023-08-15  |  点击率:1109
  作为常见的干细胞类型,人骨髓间充质干细胞广泛应用于科学研究和临床治疗。细胞具有分化潜能,可以分化为各种类型的细胞,如成骨细胞、成软骨细胞和脂肪细胞等。它们在细胞替代治疗、组织工程和再生医学领域具有巨大的应用前景。下面将为您详细介绍干细胞的提取方法。
  

人骨髓间充质干细胞

 

  首先,我们需要对提取的细胞进行严格的质量控制。这包括细胞活性检测、纯度检测和细胞计数。细胞活性检测通常使用MTT实验,将细胞与MTT试剂混合,观察细胞的生长情况。纯度检测可以通过细胞计数和血球计数板计数来实现。细胞计数时,将细胞悬液加入血球计数板,使用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行检测。细胞计数的低标准为每毫升细胞数量大于100,000个。细胞计数后,还需对细胞浓度进行检测。
  
  接下来,我们将介绍人骨髓间充质干细胞的提取方法。为了最大限度地保留细胞的活性,我们需要采用温和的方法进行提取。常用的提取方法包括小鼠骨髓提取法和人骨髓提取法。
  
  1、小鼠骨髓提取法
  
  首先,从小鼠的尾部提取约5毫升血液。然后,将血液离心,获得红细胞和血浆。血浆中含有间充质干细胞。接下来,通过免疫学实验筛选出间充质干细胞。最后,通过透射电子显微镜观察细胞形态,确保细胞结构完整。
  
  2、人骨髓提取法
  
  从成年供体获取新鲜的人骨髓,并将其冷冻保存。在实验室内,使用无菌手术刀或刮刀从供体骨髓中刮取骨髓组织。随后,将骨髓组织放入缓冲液中,进行漂洗和分离。离心后,收集上清液,并加入细胞分离液。使用悬浮细胞离心机进行细胞分离,将骨髓中的间充质干细胞提取出来。最后,使用流式细胞仪对提取出的细胞进行检测和鉴定。