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细胞学堂 | 培养基颜色改变意味着什么

更新时间:2023-04-28  |  点击率:1985


细胞培养过程中,培养基的颜色变化往往对应着细胞状态。大多数情况下,我们所见的培养基都呈红色,这是因为细胞培养基的PH值大多在7.4左右,添加了酚红的培养基的颜色就是红色。不同成分培养基的颜色会有差异,例如DMEM会比1640颜色深一点,主要是DMEM里面的酚红含量比1640多导致。当然还有部分培养基不含有酚红,呈现的就是无色或者淡黄色。


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图1:DMEM培养基正常颜色


很多时候,培养基颜色并不是我们所见的红色,而是偏紫或偏黄,不同颜色培养基究竟对应何种细胞状态呢?本期细胞学堂将为您揭晓培养基颜色变化的原因。




培养基颜色偏红或者紫




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图2:使用了一段时间后的培养基颜色偏深


开封了一段时间后的培养基,颜色会比正常深很多,如上图。主要是因为大部分细胞培养基所用的缓冲体系为NaHCO3,培养基开封后NaHCO3会分解成CO2溢出,导致培养基偏碱;可以将培养瓶拧松放置于CO2培养箱中一段时间后,培养基颜色会变正常。





颜色变深的培养基能不能继续使用?


部分细胞能够很快适应培养基的这种PH值波动,放入培养箱后可以正常生长;也有极少数的细胞会比较敏感,造成细胞漂浮过多等情况,如BV2细胞会就比较敏感,可能出现漂浮增多的情况。


Tips:建议配好完-全培养基后,分装到50mL离心管,并于一周内用完,量少时放到15mL离心管里保存。




培养基颜色变黄




通常培养基里的酚红指示剂遇酸会变黄,但也有可能是细胞被污染而导致的培养基颜色变黄,以下为几种常见情况:


#1

由于细胞代谢产酸,培养了细胞后的培养基会从红变黄,如果培养基是橘黄色,则是细胞健康生长的颜色,无须担心,继续培养即可。


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图3:培养细胞后的培养基颜色


#2

若细胞状态良好,但换液后培养基颜色变黄快,则可能是因为细胞密度大或消耗过大,提示需要传代了。

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图4:培养基快消耗完时的颜色


#3

若细胞状态差,生长异常,培养基很快变黄,变浑浊,镜下观察有较多小颗粒物,则有可能是细菌污染(如图5)或支原体污染。轻度污染可用抗生素清洗处理或使用支原体清除试剂,重度污染建议消杀后丢弃。


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图5:细菌污染时培养基颜色