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小鼠单核巨噬细胞需要怎样的培养条件?

发表时间:2022-06-15  |  点击率:188
  小鼠单核巨噬细胞是机体重要的免疫细胞,具有抗感染、抗肿瘤和免疫调节等重要作用。①抗感染:非特异性吞噬杀伤多种病原微生物,是机体非特异性免疫防御中的重要细胞。②提呈抗原、启动免疫应答:在特异性免疫应答中,绝大多数TD抗原(胸腺依赖抗原)都需经巨噬细胞吞噬和加工处理,并与其表面的MHC分子形成抗原肽-MHC复合物,表达在细胞膜表面,提呈给T细胞。巨噬细胞表面有很多黏附分子,可与T细胞表面的协同刺激分子受体结合,产生协同刺激信号,诱导T细胞的活化,启动免疫应答。③抗肿瘤:巨噬细胞被某些细胞因子如IFN-γ激活后能有效地杀伤肿瘤细胞,是参与免疫监视的重要效应细胞。④免疫调节:在特异性免疫应答中,巨噬细胞可分泌释放多种细胞因子,参与免疫调节。
  

小鼠单核巨噬细胞

 

  小鼠单核巨噬细胞具有较广泛的造血活性,可刺激中性粒细胞、单核细胞和巨噬细胞的增殖、分化和功能活性。主要用于肿瘤化疗或放疗引起的粒细胞减少。用于异体或自体骨髓移植,加速骨髓功能恢复,亦用于骨髓异常增生综合征。
  
  小鼠单核巨噬细胞的培养环境与一般贴壁细胞并无差异。即培养箱温度为37℃,CO2浓度为5%。推荐的培养基为DMEM+10%的胎牛血清;实际上,经研究者们实验发现高糖型DMEM培养的RAW264.7细胞传代后贴壁更快、细胞生长速度更快。因此,推荐使用高糖型DMEM,FBS浓度为10%,作为RAW264.7细胞的培养基。
  
  关于RAW264.7细胞的传代方法,ATCC推荐使用细胞刮刀。也可采用0.25%的胰酶消化或采用弯嘴吸管吹打等方法。采用细胞刮刀进行传代时,细胞能较大限度被收集起来,但会对细胞造成机械性损伤、影响细胞形态及贴壁时间等。采用胰酶消化时,由于RAW264.7细胞贴壁较牢,消化时间就较长。但消化时间点不易把握,易消化过度,对细胞生长造成抑制。